Introducción

La identificación microbiológica tiene gran impacto en el manejo y pronóstico de los pacientes con infecciones. La espectrometría de masas (MALDI TOF) permite una rápida y precisa identificación de diferentes microorganismos, realizándose habitualmente a partir de colonia. Sin embargo su aplicación directa a partir de muestras clínicas inoculadas en botellas de hemocultivos, permite acortar tiempos diagnósticos.

Objetivo

Describir un caso clínico donde la espectrometría de masas se utilizó para el diagnóstico etiológico de una infección osteoarticular directamente de botella de hemocultivo inoculada con líquido articular.

Material y método

Paciente de sexo femenino, 79 años, consulta en emergencia por supuración en rodilla izquierda.\ Antecedente de artroplastia de rodilla con múltiples infecciones y recambios posteriores. Múltiples planes antibióticos y limpiezas quirúrgicas. Queda ingresada por infección articular protésica con fístula. Se realiza limpieza quirúrgica con extracción de 5 muestras \ para estudio bacteriológico, 3 de tejido y 2 de líquido articular, 1 de ellas inoculada en botella de hemocultivo.Metodología microbiológica: A las muestras de tejido y líquido articular recibidas en frasco estéril se realizó: coloración de Gram, siembra en medios sólidos y líquidos; al líquido articular remitido en frasco de hemocultivo se colocó en el equipo (BACTEC Plus Aerobic/F, BD),tras su incubación y detección de positividad\  se realizó: coloración de Gram, re aislamiento en medios sólidos e identificación directa mediante Bruker MALDI Biotyper™( protocolo con agua HPLC, tubo con gel separador y lectura por protocolo Sepsityper®.) Técnica\  de 30 minutos\ aproximadamente.\ \ La identificación desde los cultivos se realizó por MALDI-TOF.El estudio susceptibilidad se realizó en equipo automatizado Phoenix® (BD) y utilizando \ gradiente antibiótico.

Resultados

La botella\  de hemocultivo se hizo positiva tras 11 horas de incubación. El MALDI TOF directo de la botella de hemocultivo informa Staphylococcus aureus con comentario “supuesta combinación con Pseudomonas aeruginosa”, con un score de \ 2.38.Los cultivos convencionales de las otras 4 muestras también fueron positivos.

Conclusiones

Destacamos la importancia de utilizar esta herramienta del MALDI TOF, con identificación directa partir de la botella de hemocultivo, en nuestro caso conteniendo líquido articular. El equipo presenta protocolo para cultivos mixtos realizando lectura a través de tipo de muestra: Sepsityper. Si bien las muestras poli microbianas se describen como limitantes para uso directo de MALDI TOF, en este caso se logró exitosamente la identificación de\  2 patógenos primarios con un tiempo menor al cultivo tradicional, adelantando la identificación en 24 horas.

Introducción

El aparato reproductor femenino presenta una superficie de contacto mucoso extenso a nivel genital, aumentando así la posibilidad de alteraciones en la microbiota habitual o de contraer Infecciones de Transmisión Sexual (ITS). En la actualidad los exudados vaginales, donde se obtienen muestras de flujo endocervical, están indicados en instancias en las que las pacientes presentan sintomatología como prurito o flujo vaginal anormal, incluso en aquellos casos en los que ya fueron tratadas con antibióticos o antimicóticos que resultaron en falla terapéutica, producto -en algunas instancias- de las resistencias antimicrobianas evidenciadas en los últimos años en patógenos como\ Neisseria gonorrhoeae.\ 

Objetivo

Determinar la prevalencia de patógenos de importancia clínica en exudados vaginales. Identificar las reincidencias y coexistencia de patógenos de transmisión sexual con microorganismos asociados a la microbiota habitual femenina en el período estudiado.

Material y método

Estudio de prevalencia, retrospectivo y descriptivo. Se utilizaron los datos obtenidos del historial de las pacientes cargados en el sistema de información de laboratorio (LIS) Modulab realizando una pesquisa en tomas recolectadas desde 01/01/2019 hasta el 31/12/2022 en mujeres de 14 a 60 años que se realizaron exudados vaginales en el laboratorio central del Hospital Escuela del Litoral “Don Luis Galán y Rocha” en el departamento de Paysandú, Uruguay.\ 

Resultados

En el período estudiado se procesaron 3038 muestras; en un 9,3% se encontró\ Gardnerella vaginalis,\ en un 8,7%\ Cándida spp.\ o\ Cándida albicans.\ Un 6,4% presentó\ Trichomonas vaginalis,\ mientras que un 2,9%\ Streptococcus agalactiae\ y un 0,4%\ Neisseria gonorrhoeae.\ De la totalidad de muestras positivas a\ Neisseria gonorrhoeae\ (14) un 92% presentó producción de betalactamasas.\ 

Conclusiones

La\ Gardnerella vaginalis\ es el patógeno más frecuente en los últimos cuatro años coexistiendo en múltiples ocasiones con patógenos de transmisión sexual como la\ Trichomonas vaginalis, mientras que la\ Cándida spp. y Cándida albicans presenta mayores recurrencias en las mujeres, El\ Streptococcus\ agalactiae se ha presentado como un agente etiológico recurrente, evidenciándose en conjunto con alteraciones de la microbiota habitual e incluso reincidiendo. Por último la producción de betalactamasas, por parte de la\ Neisseria gonorrhoeae, ha generado la necesidad en algunas instancias, de realizar tratamientos diferenciales.\ 

Introducción

En los últimos años se ha visto incrementada la incidencia de las infecciones fúngicas invasoras y las técnicas de diagnóstico micológico convencionales pueden llevar varios días incluso semanas, por lo que hoy en día es necesaria una identificación rápida y precisa. El gold standard\ para la identificación son los métodos moleculares, pero no están disponibles en todos los laboratorios clínicos. Los hongos filamentosos o mohos tienen una pared celular más robusta que los otros tipos de hongos, por lo que tienen mayor complejidad biológica. Esto trae como consecuencia que haya diferencias en la preparación y en el pretratamiento de las muestras. Vitek®MS es un sistema automatizado de identificación microbiana por espectrometría de masas. Permite la obtención de resultados de identificación a nivel de especie, género y familia, en cuestión de minutos. La espectrometría de masas es una técnica de análisis cualitativo para la determinación de estructuras orgánicas basada en la obtención de iones a partir de moléculas orgánicas en fase gaseosa. Una vez obtenidos estos iones, se separan de acuerdo a su masa y carga. El más utilizado es el MALDI-TOF MS: Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight (Desorción/ionización láser asistida por matriz-tiempo de vuelo).

Objetivo

Utilizar Vitek®MS para la identificación a nivel de género y especie de hongos filamentosos en el Hospital de Clínicas “Dr. Manuel Quintela”.

Material y método

Estudio descriptivo, transversal, realizado desde enero a julio de 2023. \ En el sector de Parasitología y Micología del Departamento de Laboratorio Clínico del Hospital de Clínicas se realizó la identificación a través del MALDI-TOF MS de hongos del género Tricophyon, Aspergillus y Fusarium. Los cuales fueron previamente identificados a nivel de género por la morfología de la colonia y sus características micromorfológicas. En el VITEK® MS se utilizó el método de extracción con EtOH-FA (VITEK® MS Mould Reagent Kit. En el cual a partir de un medio de cultivo con el moho a identificar, se suspendió una colonia en solución de etanol, luego se descartó el sobrenadante y al sedimento que se obtuvo se le agregó 40μl de solución de ácido fórmico y 40μl de acetonitrilo. Luego, se descartó el sobrenadante y ese sedimento obtenido, fue lo que se utilizó para colocarlo en el porta y que lo analice VITEK® MS. En el MALDI-TOF la muestra objetivo se preparó y se introdujo en un entorno de alto vacío, donde una ráfaga precisa del láser de nitrógeno de 337nm. ioniza la muestra, una "nube" de proteínas se libera y una carga eléctrica las acelera y tras pasar a través del electrodo anular, el "tiempo de vuelo" de las proteínas se registró empleando una fórmula del tiempo registrado. Un sensor detectó las proteínas creando un espectro que representa la composición de la proteína de cada muestra. Los portas disponen de tres áreas o grupos de adquisición, cada uno con su punto de calibración en el centro del mismo. La verificación de la operación, calibración y alineación son totalmente automáticas y transparentes para el usuario

Resultados

En un total de 17 aislamientos de hongos del género Aspergillus, se pudo identificar a nivel de especie un 94% del total. De los cuales alrededor del 30% correspondían a Aspergillus fumigatus, 20% a Aspergillus flavus, 15% a Aspergillus terreus complex, 15% a Aspergillus niger complex, 14% a Aspergillus versicolor. En un total de 9 aislamientos de hongos del género Fusarium se logró identificar un 78% del total. De los cuales 44,4% correspondìan a Fusarium oxysporum complex, 33,3% a Fusarium solani complex y un 0,3% no se logró identificar. En un total de 150 aislamientos de dermatofitos, se logró identificar un 75% principalmente del género Trichopyton. Aproximadamente el 30% correspondían a Trichopyton interdigitale, 20% a Trichopyton violaceum, alrededor del 20% a Trichopyton rubrum, 4% a Trichopyton mentagrophytes y 1% a Trichopyton tonsurans. Un 25% no se logró identificar.

Conclusiones

MALDI-TOF MS es una herramienta precisa para la identificación de patógenos fúngicos y ha reducido los tiempos en la rutina del laboratorio clínico, aunque es fundamental contar con experiencia en micología. La obtención de la biomasa y contar con una base de datos actualizada son dos grandes limitantes, que dificultan la identificación al 100% de todos los hongos filamentosos.\ 

Introducción

Las parasitosis intestinales son infecciones causadas por protozoarios o helmintos, organismos parásitos que habitan el intestino y viven a expensas de su hospedador. En la gran mayoría de los casos presentan una puerta de entrada oral y una transmisión por vía fecal oral, por ingestión de agua, alimentos, fomites o tierra contaminados con materias fecales humanas o de animales. Tienen baja mortalidad, igualmente ocasionan importantes problemas sanitarios debido a su sintomatología y complicaciones. La falta de saneamiento adecuado, los hábitos de higiene deficientes, la vivienda precaria y el hacinamiento son los factores que más influyen sobre la prevalencia de estas enfermedades.

Objetivo

El objetivo del presente trabajo es investigar la prevalencia de las parasitosis intestinales en niños del centro de atención a la infancia de San Gregorio de Polanco.

Material y método

Se realiza un estudio descriptivo, transversal y no aleatorio de los niños, niñas y adolescentes que concurren al centro de atención a la infancia de San Gregorio de Polanco (CENAI), entre octubre y noviembre del 2022. Se obtiene la aprobación del comité de ética de la Facultad de Medicina de la Universidad de la República. Se comienza con una actividad de promoción de salud sobre las parasitosis intestinales para sensibilizar y estimular la participación Se solicita a los padres y a los adolescentes la firma de un consentimiento o asentimiento informado respectivamente. Se realiza la búsqueda de parásitos intestinales a través del examen coproparasitario. Además se realiza tinción de Kinyoun para búsqueda de coccidios. Se investiga la presencia de huevos de Enterobius vermicularis con el método de la espátula adhesiva. También se realiza una entrevista telefónica a los participantes recabando datos sobre factores de riesgo y manifestaciones clínicas. Se entregan resultados individualmente y se coordina la asistencia con médico de referencia.

Resultados

De un total de 70 asistentes entre 6 y 15 años que tiene el CENAI, participaron 30. Se incluyeron 30 muestras para coproparasitario y 30 para espátula adhesiva. El porcentaje de participación representó un 43%. 15 niñas y 15 niños, de los cuales el 37% tenía entre 6 y 8 años, el 46% tenía entre 9 y 10 y un\  12% tenía entre 11 y 12. Solo un niño se encontró parasitado, lo que representa el 3% del total de nuestra población estudiada. El agente hallado fue Blastocystis spp. Fueron encuestados 24 participantes y de ese relevamiento surgió que la totalidad de sus hogares carecen de red de saneamiento y que cuentan con pozos negros. Además, que el 52% de los encuestados, alguna vez \ debieron recibir tratamiento antiparasitario

Conclusiones

Se encontró una muy baja prevalencia de parasitosis intestinales en la población estudiada. Un solo participante parasitado. Un solo parásito hallado, Blastocystis spp. No era lo esperado dado que esta localidad arrastra la carencia de un sistema de saneamiento y un estudio del año 2006 en esa misma población encontró parasitados un 53% con Enterobius vermicularis y 17 % Giardia lamblia, entre otros. El edificio donde funciona la institución actualmente, es un local proyectado para su función contra una casa que cumplía ese fin anteriormente. Consideramos que se deben estar practicando adecuadamente las medidas de prevención para estas parasitosis. Es de esperar que esta situación favorable hallada en esta población, continúe \ así, dado que sabemos que se ha iniciado la obra de saneamiento en esta ciudad.